牛FOXM1基因特异性siRNA干扰效率的分析

作者：王超; 张淑琴; 宋雪莹; 王改丽; 孙娜; 郭利^*; 程世鹏^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2019, (19): 1-175.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.10.0320

• 牛病毒性腹泻病毒
• 持续性感染
• 自噬
• 叉头框M1
• 特异性siRNA
• 干扰效率

为了筛选到有效干扰牛叉头框M1(forkhead box M1,FOXM1)基因特异性siRNA,试验设计并合成3个靶向干扰牛FOXM1的5-羧基荧光素(FAM)标记siRNA,对siRNA转染剂量进行优化,筛选出干扰效果较好的siRNA,并检测干扰FOXM1后MDBK细胞中LC3-Ⅰ/Ⅱ蛋白的表达水平。结果表明:siRNA的最佳转染剂量为1.5μL(20μmol/L),3个特异性siRNA的干扰效率分别为34.2%、52.0%及72.5%,干扰牛FOXM1基因效果最好的siRNA是siRNA-929,它能够阻止细胞中LC3-Ⅰ型向LC3-Ⅱ型的转化,使自噬过程受到抑制。说明试验成功筛选到干扰牛FOXM1基因的特异性siRNA。

• 单位
  农业部; 中国农业科学院特产研究所; 黑龙江省农业科学院; 吉林省畜牧兽医科学研究院