miR-142-3p通过靶向CD_(133)抑制鼻咽癌细胞和鼻咽癌干细胞生长的效果研究

作者：汤国辉; 张志伟; 黄卫国; 谢运杰; 刑佼涛; 贺修胜

来源：中国全科医学, 2017, 20(17): 2085-2088+2094.

• 鼻咽肿瘤
• 肿瘤干细胞
• 细胞增殖
• 细胞侵袭

目的明确miR-142-3p能否通过靶向CD133的表达进而抑制鼻咽癌细胞增殖和侵袭能力,探讨miR-142-3p在抑制肿瘤生长中的分子机制。方法于2015年7月—2016年9月,构建CD133mRNA 3’-UTR荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告系统观察miR-142-3p对CD133mRNA 3’-UTR荧光素酶活性的影响。将对照control、CD133siRNA及miR-142-3p模拟物各40μmol/L分别转染至鼻咽癌CNE2细胞,采用Western blotting法检测其对CD133表达水平的影响;设立阴性对照组[瞬时转染对照control（40μmol/L）]、阳性对照组[瞬时转染CD133siRNA（40μmol/L）]、miR-142-3p组[瞬时转染miR-142-3p模拟物（40μmol/L）]、联合组[瞬时共转染miR-142-3p模拟物（40μmol/L）和pc DNA3.1（+）-CD1330.8μg],MTS法检测4组对CNE2细胞增殖活性的影响,Transwell法检测4组对CNE2细胞侵袭能力的影响,干细胞成球实验检测阴性对照组和miR-142-3p组对CNE2干细胞成球能力的影响。结果单光子荧光素酶活性检测结果显示,无miR-142-3p转染的p CD133-Wt型细胞荧光素酶活性为（0.924±0.107）,miR-142-3p转染的p CD133-Wt型细胞荧光素酶活性为（0.535±0.035）,两者比较,差异有统计学意义（t=7.924,P=0.022）。Western blotting法检测结果显示,阴性对照组、阳性对照组、miR-142-3p组CD133表达水平比较,差异有统计学意义（F=12.44,P<0.05）;其中阳性对照组和miR-142-3p组CD133表达水平低于阴性对照组（P<0.05）。阴性对照组、阳性对照组、miR-142-3p组、联合组CNE2细胞数量比较,差异有统计学意义（F=16.78,P<0.05）;其中阳性对照组和miR-142-3p组CNE2细胞数量低于阴性对照组（P<0.05）。Transwell侵袭实验检测结果显示,阴性对照组、阳性对照组、miR-142-3p组、联合组穿过基质胶的CNE2细胞数量比较,差异有统计学意义（F=13.19,P<0.05）;其中阳性对照组和miR-142-3p组穿过基质胶的CNE2细胞数量低于阴性对照组（P<0.05）。阴性对照组和miR-142-3p组干细胞成球数量比较,差异有统计学意义（t=14.92,P<0.05）。结论 miR-142-3p通过靶向调控CD133的表达而抑制鼻咽癌细胞增殖、侵袭及干细胞球的形成。

• 单位
  南华大学附属南华医院; 南华大学