噬藻体PaV-LD主要衣壳蛋白、穿孔素和内肽酶基因的克隆及表达分析

作者：李三华; 高恶斌; 欧铜; 张奇亚

来源：水生生物学报, 2013, (02): 252-260.

• 水华蓝藻噬藻体PaV-LD
• 主要衣壳蛋白基因(073R)
• 内肽酶基因(123L)
• 穿孔素基因(124L) Cyanophage infecting bloom-forming cyanobacteria PaV-LD
• Major capsid protein gene(073R)
• Endopeptidase gene(123L)
• Holin gene(124L)

最近阐明了水华蓝藻噬藻体PaV-LD(Planktothrix agardhii Virus isolated from Lake Donghu)的全基因组序列,这是一个含有142个ORF的双链DNA噬藻体。在此,我们对其主要衣壳蛋白基因073R,内肽酶和穿孔素基因123L-124L(PaV-LD基因组中两个相邻的ORF)进行了基因克隆与表达分析。将073R克隆后构建原核表达质粒pET-32a-073R,并用IPTG进行诱导表达,073R融合蛋白经纯化后,进行免疫小鼠制备抗体;通过Western blot检测经噬藻体感染宿主细胞后073R的表达时序,结果显示在宿主细胞裂解之初,即PaV-LD感...

• 单位
  淡水生态与生物技术国家重点实验室; 中国科学院大学; 中国科学院水生生物研究所