Gluconobacter oxydans木糖醇脱氢酶基因的克隆表达及木糖醇的转化分析

作者：沈晓波; 齐向辉; 朱宏阳; 徐虹

来源：中国生物工程杂志, 2009, (12): 54-59.

DOI：10.13523/j.cb.20091210

• 葡萄糖氧化杆菌
• 木糖醇脱氢酶
• 克隆
• 表达
• 木糖醇 Gluconobacter oxydans Xylitol dehydrogenase Cloning Expression Xylitol

从氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)的基因组DNA上扩增出木糖醇脱氢酶基因xdh,构建了诱导型表达载体pSE-xdh,导入E.coliJM109后获得了高效表达木糖醇脱氢酶基因的重组菌JM109/pSE-xdh。通过HisTrap HP亲和层析和SephacrylS-300分子筛两步纯化从细胞中得到纯酶,并对酶学性质进行研究。XDH最适还原反应的pH值为5.0,最适还原反应的温度为35℃;最适氧化反应的pH值为11.0,最适氧化反应的温度为30℃。重组菌中的XDH依赖NADH,对NADH的米氏常数Km=57.8 mmol/L,最大反应速率Vmax=1209.1 mm...

• 单位
  南京工业大学; 食品与生物工程学院; 材料化学工程国家重点实验室; 江苏大学