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摘要
目的:研究大鼠骨髓间充质干细胞与髁突软骨细胞共培养对骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)向软骨化分化的影响。方法:分离、培养大鼠BMSCs与髁突软骨细胞,取第2代细胞以2∶1比例混匀为共培养组,细胞终浓度为1.2×104/mL;以相同浓度的髁突软骨细胞作为实验组,以相同浓度的BMSCs作为对照组。倒置显微镜下观察细胞形态;以CCK-8法检测细胞增殖;阿利新蓝染色、ALP染色及定量分析检测细胞成软骨分化;Western免疫印迹检测Ⅱ型胶原、Ⅹ型胶原的表达。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:共培养组与实验组细胞呈多角形、铺路石样排列,为典型软骨细胞形态,而对照组细胞呈长梭形。细胞生长曲线显示,共培养组较其他2组细胞增殖能力强;共培养组与实验组阿利新兰染色、ALP染色均为阳性;Western免疫印迹显示,共培养组细胞的Ⅱ型胶原、Ⅹ型胶原的表达显著升高。结论:在共培养中,BMSCs有利于髁突软骨细胞表型的维持以及促进软骨细胞的增殖;同时,髁突软骨细胞具有诱导BMSCs向软骨分化的作用。
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