猪SIgA分泌片的表达及其多克隆抗体的制备

作者：朱利塞; 贾爱卿; 王贵平; 王娟; 李菲; 邓胜朝; 钱雪桥^*; 丁壮

来源：中国动物传染病学报, 2020, 28(03): 68-72.

• SIgA
• 分泌片
• 多克隆抗体
• 黏膜免疫

SIgA是评价黏膜免疫的重要指标,分泌片(SC)是SIgA的特有成分,为了更方便的获得大量的SIgA的分泌片,本研究应用RT-PCR方法扩增出SC基因片段,将SC基因片段克隆到pGEX-4T-1原核表达载体上,经酶切和测序验证获得pGEX-4T-1-SC重组质粒;将获得的pGEX-4T-1-SC转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达重组蛋白rSC。重组蛋白rSC经鉴定和纯化后,按常规免疫程序制备多克隆抗体;利用Western blot对抗重组蛋白rSC的多克隆抗体进行鉴定。结果显示,该抗体能特异性识别猪初乳中的SIgA免疫球蛋白,而与猪初乳中的IgG不发生反应。因此,抗SC重组蛋白的多克隆抗体可以作为抗SIgA免疫球蛋白的特异性抗体,为进一步建立SIgA的检测方法及黏膜免疫的研究奠定基础。

• 单位
  吉林大学; 广东海大集团股份有限公司畜牧水产研究中心