大鼠肾小球足细胞的原代培养与鉴定

作者：陶于洪; 王亚妹; 彭文珍

来源：四川大学学报（医学版）, 2013, 44(06): 987-990.

DOI：10.13464/j.scuxbyxb.2013.06.030

• 肾小球
• 足细胞
• 原代培养
• 大鼠
• Wilms瘤抑癌因子-1

目的建立一种简单适用的原代培养与鉴定大鼠肾小球足细胞的方法。方法通过差异过筛法收获SD大鼠(体质量60~100g)肾小球,2g/LⅣ型胶原酶消化肾小球,组织块种植法将肾小球种植于添加有ITS-X(含转铁蛋白-亚硒酸钠-胰岛素)的K1-3T3培养基,9~10d后首次传代培养。通过观察细胞形态结合免疫组织化学SP法检测角蛋白、结蛋白和Wilms瘤抑癌因子-1(WT-1)表达以鉴定足细胞。结果种植肾小球3d后,可见从肾小球内生长出来的细胞逐渐增多,9~10d后融合成鹅卵石样外观。传代后的细胞变为大而扁平的星形细胞,有明显突起和微绒毛;免疫组织化学法显示结蛋白表达呈阴性、角蛋白和WT-1表达呈阳性,提示所培养的细胞为足细胞。结论种植胶原酶消化的肾小球是一种简单易行的原代培养大鼠肾小球足细胞方法。WT-1可作为鉴定大鼠肾小球足细胞的合适标记。

• 单位
  四川大学; 四川大学华西第二医院