荧光定量PCR辐照食品鉴定技术的优化研究

作者：刘绵学; 伏毅; 郑宇; 王艳; 潘琳; 李华; 黄敏^*

来源：生物技术通报, 2018, 34(12): 77-83.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0481

• 辐照鉴定
• 转座子
• 马铃薯
• DNA损伤

为优化荧光定量PCR辐照食品鉴定技术方法,实现对假阳性样本的鉴别能力,降低模板量对鉴定结果的干扰效应。选择马铃薯作为研究材料,分别进行1-12 kGy的60Co辐照、加热和冻融处理,通过转座子引物筛选、检出限分析、DNA损伤特征比较和剂量曲线回归等方法,探究转座子引物的应用对马铃薯辐照鉴定结果的优化效果。结果显示,转座子引物组合LTR2-5\18S-8与LTR2-2\ACT-5可用于假阳性样本的鉴别,引物组合LTR2-5\18S-5可用于辐照鉴定。优化后方法中"初始循环数差值的指数函数-辐照剂量"标准曲线方程为Y=-0.1581X+4.611,线性关系R2为99.24%,优于"初始循环数差值-辐照剂量"的原有模式。通过转座子引物的应用与方法优化,增强了假阳性鉴别能力,消除了模板差异,增强了荧光定量PCR辐照鉴定技术的"剂量-效应关系"。

• 单位
  四川省原子能研究院