摘要

目的 研究乳腺癌细胞外泌体对肝星状细胞的作用。方法 通过超速差速离心法提取乳腺癌细胞外泌体,通过透射电子显微镜、粒径分析软件和蛋白印迹分析等实验鉴定外泌体的形态结构、粒径分布及标志蛋白CD63的表达。通过活细胞荧光显微镜观察荧光标记后外泌体被肝星状细胞的摄取情况。通过蛋白印迹分析研究经乳腺癌细胞外泌体处理后的肝星状细胞中α-平滑肌肌动蛋白的表达水平。结果 透射电子显微镜显示乳腺癌细胞外泌体为类圆形双层膜的囊泡样结构;粒径分析显示外泌体大小分布范围为30~200 nm;蛋白印迹分析显示外泌体表面标志蛋白CD63为阳性。通过活细胞荧光显微镜观察发现PKH67标记的外泌体能够被DAPI标记的肝星状细胞摄取。蛋白印迹分析结果显示经乳腺癌细胞外泌体处理过的肝星状细胞中α-SMA的蛋白表达水平较对照组显著提高。结论 肝星状细胞与乳腺癌细胞外泌体共孵育后能够被激活为肿瘤相关成纤维细胞。

  • 单位
    牡丹江医学院; 牡丹江医学院附属红旗医院

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