携带靶向抑制囊泡谷氨酸转运体3干扰RNA的单纯疱疹病毒载体可减弱小鼠触诱发痛

作者：刘洁琼; 李臣鸿; 罗琼; 尹平平; 雷涛; 罗放

来源：南方医科大学学报, 2016, 36(11): 1449-1455.

DOI：10.3969/j.issn.1673-4254.2016.11.01

• RNA干扰
• 囊泡谷氨酸转运体3
• 痛觉过敏
• 1型单纯疱疹病毒

目的 构建含靶向囊泡谷氨转运体3(Vglut 3)的特异性RNA干扰序列的l型单纯疱疹病毒载体,并观察其经坐骨神经接种后缓解小鼠触诱发痛的作用.方法 首先构建携带Vglut3特异性短发卡RNA(shRNA)的重组1型单纯疱疹病毒载体.将重组载体通过坐骨神经接种,检测其在小鼠触诱发痛模型中的镇痛效果.分别用von Frey丝和Hargreaves'实验测试小鼠的机械性触诱发痛和热痛敏,通过免疫组织化学和免疫印迹法评估背根神经节中VGLUT3的表达.结果 成功构建了重组l型单纯疱疹病毒载体HSV-1-shvglut3.经坐骨神经接种后,该载体可将Vglut3特异性shRNA逆行运输至背根神经节.触诱发性疼痛模型小鼠接种HSV-1-shvglut3载体2周后,背根神经节中VGLUT3表达下调,小鼠的机械性缩爪阈值回升至大致基础水平.这种镇痛效应持续超过两个星期,未出现明显的系统副作用,且小鼠热痛阈没有明显变化.结论 表达于背根神经节中的Vglut3是一个针对触诱发痛极具前景的干扰靶点.我们构建的HSV-1-shvglut3载体通过外周接种,对触诱发痛有特异、安全、高效、持久的镇痛作用.

• 单位
  生物医学工程学院; 华中科技大学同济医学院附属同济医院; 中南民族大学; 武汉大学中南医院