猪流行性腹泻病毒变异毒株一步法双重RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用

作者：颜邦斌; 樊平; 王怀禹

来源：黑龙江畜牧兽医, 2018, (09): 115-118.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2017.05.0381

• 猪流行性腹泻病毒
• 变异毒株
• 经典毒株
• 疫苗株
• RT-PCR
• 鉴别诊断

为了建立与应用一种快速鉴别检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异毒株的方法,试验采用特异性试验、敏感性试验、临床应用等方法对鉴别诊断PEDV变异毒株的一步法双重RT-PCR方法进行了研究。结果表明:该方法对PEDV变异毒株能扩增出大小为870 bp和543 bp的二条特异性条带,对PEDV经典毒株和疫苗株均只能扩增出大小为543 bp的一条特异性条带;对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(RV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)均无任何扩增条带;对变异毒株、经典毒株、疫苗株的检测灵敏度分别达0.75 ng、0.80 ng、0.09 ng的RNA含量;用该方法检测136份猪腹泻病料样品,共检测出阳性样品72份,其中变异毒株阳性样品65份,变异毒株阳性率达47.79%,与基于S基因单重RT-PCR方法和基于ORF3基因单重RT-PCR方法的符合率均为100%。说明该一步法双重RT-PCR鉴别检测方法具有良好的特异性和敏感性,操作简单,可以准确、快速鉴别诊断出PEDV变异毒株。

• 单位
  南充职业技术学院