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摘要
为了研究植物WRKY转录因子感知盐碱胁迫信号并通过生理和生化调节途径来维持其耐性功能作用。克隆紫穗槐（Amorpha fruticosa）的AfWRKY42基因，分析盐（NaCl）和碱（NaHCO3）胁迫和组织器官的响应表达模式；通过超表达烟草（Nicotiana tabacum）研究其耐盐碱性功能。依据紫穗槐逆境胁迫下的转录组测序数据克隆AfWRKY42基因，生物信息分析其含有1个WRKY结构域，2个低复杂区域和1个螺旋区域。系统进化树分析氨基酸发现，AfWRKY42与木豆（Cajanus cajan）的WRKY47、藜豆（Mucuna pruriens）的WRKY42亲缘关系最近。通过拟南芥（Arabidopsis thaliana）叶肉原生质体的瞬时基因表达系统验证AfWRKY42蛋白定位在细胞核；AfWRKY42基因定量分析表明其在紫穗槐的嫩茎表皮中表达最高；检测经NaCl和NaHCO3处理的根和叶中的表达模式，结果表明总体受胁迫诱导AfWRKY42基因表达量增加，推测AfWRKY42基因与植物耐盐碱性调节相关。分析35S启动的过表达T3代转AfWRKY42基因烟草耐盐碱性表明，盐碱胁迫处理后，转基因烟草株系抗性提高，它的叶绿素和电导率比野生型的高，丙二醛含量显著降低，说明AfWRKY42在响应盐碱胁迫中扮演重要的调节角色。将为抗盐碱性育种提供一个WRKY转录因子候选基因，为改善紫穗槐和其他植物的抗逆性奠定基础。
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单位生命科学学院; 黑龙江生态工程职业学院; 黑龙江省农业科学院; 东北林业大学
