花青素-3-葡萄糖苷干预过氧化氢诱导的H9c2细胞损伤的作用机制

作者：袁晓丽; 江莉; 黄莉莉^*; 胡斌

来源：中西医结合心脑血管病杂志, 2023, 21(17): 3146-3153.

• H9c2心肌细胞
• 氧化损伤
• 花青素-3-葡萄糖苷
• 细胞凋亡
• 活性氧
• 实验研究

目的:探究花青素-3-葡萄糖苷干预过氧化氢(H2O2)诱导的H9c2细胞损伤的作用机制。方法:将H9c2细胞暴露于不同浓度H2O2中4、8、12 h诱导细胞毒性，同时以不同浓度花青素-3-葡萄糖苷处理细胞，并设置阳性对照组(1.5 mg/mL益气活血颗粒),采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率，Hoechst 33342染色和流式细胞术检测细胞凋亡，实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和蛋白免疫印迹法检测细胞中解偶联蛋白2(UCP2)表达，二氢乙锭(DHE)染色检测活性氧(ROS)含量，蛋白免疫印迹法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及切割后半胱天冬酶3(Cleaved Caspase-3)的表达。结果:600μmol/L的H2O2处理4 h为最佳造模条件，50.00μmol/L为花青素-3-葡萄糖苷最适药物干预浓度。与对照组比较，H2O2组细胞凋亡率、Bax/Bcl-2及Cleaved Caspase-3表达明显升高，UCP2 mRNA及蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05);与H2O2组比较，H2O2+花青素-3-葡萄糖苷组和H2O2+益气活血颗粒组细胞凋亡率、Bax/Bcl-2及Cleaved Caspase-3表达明显降低，UCP2 mRNA及蛋白表达明显升高，差异均有统计学意义(P<0.05)。shRNA-3可明显降低细胞中UCP2蛋白表达，与H2O2组比较，H2O2+shRNA-3组UCP2、Bcl-2蛋白表达明显降低，Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达及ROS含量明显升高，差异均有统计学意义(P<0.05);与H2O2+shRNA-3组比较，花青素-3-葡萄糖苷处理后UCP2、Bcl-2蛋白表达明显升高，Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达ROS含量明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:花青素-3-葡萄糖苷对H2O2诱导的H9c2细胞凋亡有显著的保护作用，其机制可能与上调UCP2表达，从而降低Bax/Bcl-2、Cleaved Caspase-3表达，清除ROS有关。

• 单位
  绵阳市中心医院; 西南医科大学