Alu-反向PCR检测HIV-1整合位点方法的建立

作者：田亚坤; 李侗曾; 焦艳梅; 李娟; 画伟; 吴昊

来源：北京医学, 2010, 32(12): 965-968.

DOI：10.15932/j.0253-9713.2010.12.011

• HIV-1
• 整合型HIV
• Alu序列
• 反向PCR

目的建立Alu-反向PCR检测整合型HIV-1DNA的实验方法。方法收集18例HIV-1感染者及12例健康者的抗凝血标本,根据整合型HIV-1DNA的特点设计引物,第一轮PCR5’端引物来自于人类保守的Alu序列,3’端引物来自于HIV-1gag序列,扩增片段包含了整合位点上游的人类基因组DNA序列和整合的HIV-1DNA序列。经PstⅠ酶切后进行自身片段环化,以此为模板设计针对HIV-1LTR和gag保守区域引物,进行巢式PCR。结果 16例HIV-1感染者成功扩增出目的片段,12例健康者均为阴性。结论本实验建立的检测整合型HIV-1的方法为进一步研究HIV病毒储藏库机制提供了参考。

• 单位
  首都医科大学附属北京佑安医院