摘要
目的探讨A型肉毒毒素(BTXA)对增生性瘢痕组织成纤维细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法用含有0.2~1.6 U/mL浓度的BTXA的培养液孵育增生性瘢痕的成纤维细胞24 h、48 h,采用MTT法检测BTXA对瘢痕成纤维细胞增殖的影响;用2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFDA)染色法结合荧光酶标仪检测BTXA对成纤维胞内活性氧(ROS)产生的影响;吖啶橙-溴化乙锭(AO/EtBr)双染色的方法检测细胞凋亡形态变化;JC-1法检测成纤维细胞线粒体膜电位(MMP)的变化;RT-PCR检测其不同浓度BTXA干预后的成纤维细胞的caspase-3、caspase-9、Bcl-2、Bax、Bid mRNA的表达情况。结果 BTXA可以抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖,促进其凋亡,并且这种抑制作用随着药物浓度的增高而加强。随着BTXA浓度的增加caspase-3、caspase-9、Bax、Bid mRNA的表达明显升高,Bcl-2水平降低。结论 BTXA抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖,促进其凋亡的其机制可能是通过增加细胞内活性氧,上调凋亡因子Bax、Bid的表达,下调抗凋亡因子Bcl-2的表达,从而激活caspase依赖的凋亡途径有关。
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单位秦皇岛市第一医院