奶牛源绿脓杆菌内毒素蛋白的提取及免疫原性和保护性研究

作者：曲晓军; 王金英; 孙建华; 于冲; 夏海华; 潘钰

来源：黑龙江畜牧兽医, 2019, (07): 25-28.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.05.0035

• 绿脓杆菌
• 内毒素蛋白
• 提取
• 免疫
• 间接ELISA
• 攻毒

为了评估绿脓杆菌内毒素蛋白的免疫原性和保护性,试验采用最小致死量(MLD)测定法从奶牛源绿脓杆菌菌株中筛选高毒力菌株,用可使蛋白质与脂多糖分离的合成培养基进行发酵、提取、纯化制备内毒素蛋白,采用考马斯亮蓝法测定内毒素蛋白含量,间接ELISA法和免疫攻毒保护试验对制备的内毒素蛋白进行免疫原性和保护性研究。结果表明:筛选得到1株高毒力绿脓杆菌CPA-009菌株,其MLD为2.0×107 cfu/mL;用CPA-009菌株发酵制备出5批次内毒素蛋白,平均含量为44.62%,各批次间差异不显著(P>0.05);免疫组小鼠体内抗体效价随着免疫进程持续升高,最高达到1∶12 500;内毒素蛋白对CPA-009菌株的保护率为100%,对其他3种血清型绿脓杆菌菌株的保护率均在80.0%以上。说明由高毒力绿脓杆菌CPA-009菌株制备的内毒素蛋白具有良好的免疫原性和高保护性。

• 单位
  黑龙江省科学院微生物研究所; 黑龙江省科学院高技术研究院