微针皮内免疫增强新型冠状病毒S1蛋白免疫原性研究

作者：孙鑫; 陈彩迪; 毕研伟; 刘晓娟; 李俊; 肖红剑; 姚宇峰; 李智华; 寸韡^*

来源：中国病毒病杂志, 2023, 13(04): 252-259.

DOI：10.16505/j.2095-0136.2023.0023

• 新型冠状病毒
• 皮内免疫
• 微针
• 体液免疫
• 细胞免疫

目的 研究新型皮内免疫方法对新型冠状病毒重组S1(rS1)蛋白的免疫效果。方法 112只BALB/c小鼠随机分为对照组[只注射Al(OH)3佐剂]、5μg S1组、5μg S1+Al(OH)3组、10μg S1组、10μg S1+Al(OH)3组、20μg S1组、20μg S1+Al(OH)3组，每组分别进行肌内免疫和微针皮内免疫，各组免疫所用S1蛋白与佐剂Al(OH)3质量比为1∶10，共14组，每组8只。免疫程序为0、2和4周3次免疫。通过酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）比较不同免疫途径和免疫剂量诱导的IgG、IgG1和IgG2a结合抗体水平。用SARS-CoV-2野生型（WT）和Omicron(BA. 5)假病毒来评估中和抗体的水平。通过酶联免疫斑点实验（enzyme-linked immunosorbent spot,ELISpot）对细胞免疫反应进行评估。抗体终点滴度和中和数据通过Kruskal-Wallis检验进行分析，细胞免疫数据使用单因素方差分析进行分析。结果 皮内免疫新型冠状病毒rS1蛋白诱导IgG、IgG1、IgG2a抗体效价高于肌内免疫。免疫rS1蛋白产生的特异性抗血清对新型冠状病毒野生型和Omicron BA. 5有明显的中和效果，并且皮内免疫组诱导小鼠产生的中和抗体水平高于肌内免疫组，皮内免疫10μg+Al(OH)3对野生型新型冠状病毒的中和抗体GMT为922，对Omicron BA. 5的中和抗体GMT为99。免疫rS1蛋白的小鼠脾淋巴细胞IFN-γ和IL-4水平上升，且皮内组免疫诱导小鼠产生的细胞免疫反应高于肌内免疫组，皮内免疫20μg组引起的IFN-γ水平最高[（370.7±42.36）个免疫斑点]；皮内免疫10μg+Al(OH)3组引起的IL-4水平最高[（416.7±51.83）个免疫斑点]。结论 皮内免疫引起的免疫应答强于传统的肌内免疫方法，可应用于后续疫苗接种策略。

• 单位
  昆明医科大学; 中国医学科学院医学生物学研究所