Smad通路参与应力诱导颞下颌关节滑膜细胞蛋白多糖4表达的研究

作者：徐婷; 吴慧玲; 冯剑颖; 谷志远

来源：中华口腔医学杂志, 2014, 49(02): 101-105.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1002-0098.2014.02.008

• 颞下颌关节
• 蛋白多糖4
• 滑膜细胞

目的观察应力刺激对大鼠颞下颌关节滑膜细胞蛋白多糖4(proteoglycan 4,PRG4)表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法将体外培养的20只SD大鼠颞下颌关节滑膜细胞分为两组,加力组施加间歇静压力,压力值100 kPa,加载频率为4 h/d;对照组为未加载应力的滑膜细胞。采用蛋白质印迹法和细胞免疫荧光技术分别在实验各时间点检测Smad通路和p38丝裂原激活蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)通路相关蛋白的表达变化;应用转化生长因子(transforming growthfactor,TGF)β1受体抑制剂SB431542预处理后,蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR技术观察72 h后对照组和加力组PRG-4表达的变化。结果蛋白质印迹法检测显示,间歇静压力作用1 b后,Smad-2、-3蛋白磷酸化水平显著升高,分别在2、4 h达到峰值。而在实验1、2及4 h观察p38蛋白磷酸化水平与对照组相比无明显变化。细胞免疫荧光结果显示,间歇静压力作用使Smad-2、-3蛋白发生核转位,且胞内荧光信号比对照组明显增强(24.11±4.70)(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测显示,间歇静压力促进滑膜细胞PRG4 mR]NA的表达量(1.48±0.08)显著高于对照组(P<0.05),加入SB431542预处理后再加力,PRG4 mRNA表达量较加力组显著降低(0.47±0.05)(P<0.05)。蛋白质印迹法检测显示,各组PRG4蛋白表达量受抑制趋势与实时荧光定量PCR结果相一致。结论 Smad信号通路是参与调节间歇静压力诱导滑膜细胞PRG4表达的一条重要途径。

• 单位
  浙江中医药大学; 浙江大学医学院附属第一医院