基于λ核酸外切酶辅助的级联型铜离子荧光检测体系的构建

作者：刘陈; 刘金权; 郦瑜杰; 廖力夫; 肖锡林^*

来源：南华大学学报(自然科学版), 2022, 36(03): 69-76.

DOI：10.19431/j.cnki.1673-0062.2022.03.010

• 荧光核酸传感器
• 级联反应
• λ核酸外切酶
• 催化发夹自组装
• 铜离子

通过将一种有效的级联信号放大策略引入铜离子荧光生物传感器中，构建了一种用于超灵敏检测铜离子的荧光检测体系。这种级联型荧光检测体系结合了λ核酸外切酶辅助的靶标回收和催化发夹自组装的循环信号扩增。在铜离子的存在下，用于识别铜离子的功能核酸的底物链被特异性切割和释放。释放出的单链DNA片段(tDNA)与5′端被磷酸标记的双链DNA(TQ-DNA)杂交形成具有平末端的双链DNA。随后，该DNA分子被λ核酸外切酶识别并切割，释放出游离的tDNA和TDNA。随着λ核酸外切酶的水解，越来越多的tDNA被回收，同时放出越来越多的TDNA。此时，TDNA作为催化发夹自组装反应的触发链，启动了新一轮的靶标循环。在TDNA的辅助下，作为分子信标的发夹DNA会与另外一个发夹DNA杂交形成新的双链DNA,同时，释放出高荧光强度。利用荧光光谱法对该体系不同反应阶段进行了表征。结果表明，该级联型铜离子荧光检测体系对痕量铜离子具有很好的响应。

• 单位
  公共卫生学院; 南华大学; 化学化工学院