高效分子排阻色谱法测定抗毒素/抗血清类制品纯度

作者：周勤; **明; 赵沁; 段徐华; 吴利红; 邵泓; 陈钢^*

来源：中国现代应用药学, 2021, 38(12): 1484-1489.

DOI：10.13748/j.cnki.issn1007-7693.2021.12.013

• 高效分子排阻色谱法
• 抗毒素/抗血清类制品
• 纯度

目的建立高效分子排阻色谱法(high performance size exclusion chromatography,HPSEC)测定抗毒素/抗血清类制品纯度,并应用该方法对52批样品进行测定。方法采用TOSOH TSKgelG3000SWxl色谱柱,以含1%异丙醇,0.2 mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH 7.0)为流动相,流速0.6 mL·min-1,检测波长280 nm,进样体积20μL,柱温室温,按面积归一化法计算各组分相对百分含量。结果选取抗毒素类和抗血清类制品各1批,在蛋白质浓度为1.2～24 mg·mL-1时,主峰F(ab’)2、大分子杂质峰和小分子杂质峰峰面积均与相应蛋白质浓度呈良好线性关系(n=5,r>0.999 0),重复性RSD均在0.4%～0.9%(n=6),主成分F(ab’)2定量限分别为0.1μg和0.2μg,检出限分别为0.02μg和0.1μg,制备的供试品溶液在室温条件下12 h内各组分稳定性良好。结论建立的HPSEC可用于抗毒素/抗血清类制品纯度的测定。