双酚A不同昼夜节律时间点暴露对小鼠肝脏脂质代谢的影响

作者:张岩; 王敏; 周梦雅; 卢智田; 李旭东; 张慧红; 吴帆; 庄润璇; 何志妮; 李文学; 杨光宇; 朱伟; 张波
来源:环境与职业医学, 2022, 39(12): 1336-1342.
DOI:10.11836/JEOM22248

摘要

[背景]肝脏脂质代谢呈现昼夜变化,昼夜节律影响环境化学物的肝毒性。[目的]观察不同昼夜节律时间点双酚A(BPA)暴露对小鼠肝脏、血液脂质代谢指标影响的差异,探索昼夜节律核心基因在BPA干扰肝脏脂质代谢中的作用机制。[方法]首先选用35只雌性C57BL/6J小鼠在24 h光照周期内(光照/黑暗为12 h/12 h)每隔4 h处死5只,收集肝脏组织,检测昼夜节律核心基因Rev-erbα、Bmal1、Clock及调控脂质代谢关键转录因子基因Srebp1c、Chrebp在24 h内不同昼夜节律时间点的表达。随后,将30只雌性C57BL/6J小鼠随机分为6组,每个时间点设置对照组、BPA 50μg·kg-1·d-1和BPA 500μg·kg-1·d-1组。分别于开灯3 h后(ZT3,光照期)和关灯3 h后(ZT15,黑暗期)两个时间点经口灌胃BPA,每日灌胃1次,连续4周。实验期间小鼠自由饮食,每周测量体重。实验结束后在ZT3收集血浆,分离肝组织,测定生化指标,检测肝昼夜节律核心基因和脂质代谢基因mRNA表达水平。[结果]小鼠肝脏Rev-erbα、Bmal1和Clock以及Srebp1c、Chrebp转录水平呈现24 h昼夜节律。ZT3和ZT15 BPA染毒4周均未引起小鼠体重、血浆葡萄糖、血浆总胆固醇、血浆低密度脂蛋白胆固醇和血浆甘油三酯明显改变(P> 0.05)。ZT3染毒时,50μg·kg-1·d-1 BPA组小鼠血浆高密度脂蛋白胆固醇含量较对照组降低了14.56%(P -1·d-1BPA组小鼠肝脏甘油三酯含量较对照组增加了115.20%(P <0.05)。与对照组相比,ZT3染毒时,BPA组Srebp1c mRNA表达下调;ZT15染毒时,BPA组Chrebp、Srebp1c、Acc1 mRNA表达上调(P <0.05)。Z T3染毒时,BPA组Bmal1 mRNA表达上调,Rev-erba mRNA表达下调;而ZT15染毒时,BPA组Bmal1 mRNA表达下调,Rev-erba mRNA表达上调(P <0.05)。[结论]不同昼夜节律时间点BPA暴露对小鼠肝脏脂质代谢的影响不同。黑暗期染毒引起肝脏脂质沉积,可能的机制是干扰Rev-erbα和Bmal1构成的昼夜节律反馈环路,上调调控脂质合成的核受体Srebp1c和Chrebp及其靶基因Acc1表达水平,促进肝脏脂质沉积。

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