H1-SIV、H3-SIV和NA-PRRSV、EU-PRRSV多重PCR检测方法的建立及应用

作者：徐毅; 余良政; 林霜; 任同伟; 王豪; 曾昊; 郭嘉宁; 郭金凡; 黄崇强; 欧阳康; 黄伟坚; 韦祖樟; 陈樱

来源：中国动物传染病学报, 2021, 1-10.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20211104.007

• 猪流感病毒
• 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• 多重PCR

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染肺泡巨噬细胞，严重损害免疫系统，导致与其他病毒共感染现象，其中猪流感病毒（SIV）也是病原之一。为了快速检测和区分PRRSV基因型与SIV亚型，本研究针对H1、H3亚型SIV的HA基因和美洲型、欧洲型PRRSV的N、M基因的保守序列，分别设计了四对特异性扩增引物，在引物浓度、退火温度等反应条件的系统优化下，分别对其特异性和敏感性进行验证，建立了能够快速检测以上4种病原的多重PCR方法，并对155份临床样品进行了检测。结果显示，该检测方法特异性好、灵敏度高，对H1-SIV、H3-SIV、NA-PRRSV和EU-PRRSV的最低检出量均低至9.86×10~(0 )copies/μL。以单一PCR方法对所有临床样品进行检测后发现，检测结果与多重PCR检测结果一致，证明这种多重PCR方法可以用于这4种病毒的快速检测与分型鉴定。

• 单位
  广西大学