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摘要
CD8α、CD207为树突状细胞（Dendritic cells，DCs）表面重要的表型分子，在树突状细胞介导的适应性免疫中发挥重要作用。为探讨它们在草鱼 (Ctenopharyngodon idella) DCs抗细菌免疫应答中的作用，本实验从草鱼DCs的cDNA中扩增CD8α、CD207胞外区，构建重组表达质粒pET-32a- CD8α/CD207，并转化到感受态细胞Transetta (DE3)，表达纯化后制备CD8α、CD207多克隆抗体。利用qPCR，Western blot及流式细胞术揭示草鱼CD8α、CD207在抗细菌免疫过程中发挥的功能。结果显示，制备的多克隆抗体既能识别原核表达的重组蛋白，也能识别个体和细胞水平上的内源蛋白。从功能上看，灭活嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila) 处理草鱼DCs后，在24h内，CD8α和CD207的表达量均有显著上调 (P<0.05)；且CD8α和CD207分子在草鱼DCs呈递抗原刺激混合淋巴细胞增殖这一过程中发挥重要作用。因此，草鱼DCs表现出与哺乳动物相似的保守免疫表型和功能，研究结果也为阐明草鱼DCs介导的适应性免疫调节机制奠定基础。
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