4种方法对肠道致病菌的核酸提取效率比较

作者：徐颖; 张瑾; 滕新栋; 张娟; 孙燕茹; 梁洁; 徐翮飞; 杜建森

来源：口岸卫生控制, 2022, 27(02): 29-33.

• 革兰氏阴性菌
• 核酸提取
• 肠道致病菌

目的 比较并筛选出简单、有效、经济的提取革兰氏阴性肠道致病菌核酸的方法。方法 用水煮法、碱液加热裂解法、Chelex-100提取法、商品试剂盒法同时提取大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌的标准菌株的基因组DNA，用特异性引物进行PCR扩增检验DNA提取效率。结果 水煮法、碱液加热裂解法、Chelex-100提取法、商品DNA试剂盒提取法都能有效提取细菌基因组DNA。经PCR扩增检验，水煮法提取的核酸检测效率最低，碱液加热裂解法、Chelex-100提取法、商品试剂盒法均能获得明亮的特异性条带。结论 碱液加热裂解法对革兰氏阴性肠道致病菌的核酸提取效率高、操作简单、成本低廉，适合同时处理大量样本的口岸一线实验室使用。