A型肉毒毒素轻链抑制剂苯并硒唑衍生物的合成及活性评价

作者：刘佳; 沈**; 黄超; 余硕; 黄秋园; 余云舟; 戴秋云; 孙黔云^*

来源：军事医学, 2021, 45(06): 418-425.

• A型肉毒毒素
• 轻链
• 苯并硒唑衍生物
• 抑制活性
• 解毒活性
• 荧光共振能量转移

目的合成一系列含芳香基、直链取代基苯并硒唑,抑制A型肉毒毒素(Bo NT/A)轻链活性,获得A型肉毒毒素(Bo NT/A)的解毒剂。方法以邻氨基苯甲酸甲酯为起始原料,经重氮化、酰氯化合成中间产物2-硒化苯甲酰氯,再与含不同取代基的芳香胺、直链胺反应合成一系列依布硒啉(ebselen)类及其他苯并硒唑衍生物。采用荧光共振能量转移法(FRET)测定各苯并硒唑衍生物对Bo NT/A轻链的抑制活性,测定它们与谷胱甘肽(GSH)的反应性,以考察其与体内其他蛋白或含巯基分子的反应性,最后测定各抑制剂的体内解毒活性。结果 4-甲酸基、4-乙酸基取代依布硒啉的抑制轻链活性(IC50分别为0.81、0.42μmol/L)高于依布硒啉(IC50=1.31μmol/L)1～2倍;含丙酸基、甲基、乙基、氟、氯、溴、胺基、甲氧基、3,5-二甲氧基依布硒啉硒唑衍生物以及喹啉基、直链丁酸基及己酸基苯并硒唑活性降低(IC50为4.16～7.18μmol/L);而依布硒啉邻羧基衍生物、苯并咪唑硒唑的抑制剂活性显著下降(IC50>10μmol/L)。GSH与含苯并咪唑硒唑、依布硒啉邻羧基衍生物反应较慢,其余均较快。2LD50的Bo NT/A给毒1 h后,单次或多次给予20 mg/kg依布硒啉或其他苯并硒唑衍生物,苯并咪唑硒唑组可显著提高小鼠在72 h内的生存率。结论在依布硒啉右侧苯环上连接甲酸基和乙酸基后能提升其对Bo NT/A轻链抑制活性,并增加了水溶性,但不能提高体内活性,苯并咪唑硒唑可显著提高小鼠在72 h内的生存率。

• 单位
  贵州医科大学