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摘要
为系统地探讨阿魏酸抑制黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase, XO)活性的分子机制，采用酶学和光谱学方法测定了阿魏酸对XO抑制可逆性、抑制动力学、结合性质及结构的影响，采用分子模拟技术预测了阿魏酸与XO的结合构象。结果表明：在混合竞争的方式下，阿魏酸能可逆地抑制XO活性，抑制常数为4.5μmol/L,与咖啡酸、对香豆酸、绿原酸和没食子酸相比，阿魏酸对XO的抑制能力最强，其半抑制浓度为116.2μmol/L。荧光滴定实验结果表明：阿魏酸通过动态静态混合猝灭方式使XO荧光减少，其中静态猝灭占主导，且与XO存在一个结合位点，结合常数为3.38×104 L/mol(298 K);ΔG<0、ΔH<0和ΔS>0,表明该结合过程主要是以氢键和疏水作用力驱动且自发进行。分子对接结果揭示了阿魏酸进入了XO中黄素腺嘌呤二核苷酸活性区域，影响XO正常催化过程。同步荧光光谱和圆二色光谱实验表明：阿魏酸能改变XO的二级和三级结构，使XO中酪氨酸和色氨酸残基周围极性增加及疏水性降低，并且α-螺旋含量升高，β-折叠含量降低，使XO二级结构趋于紧密，这是影响XO活性的另一原因。研究以期为阿魏酸作为XO抑制剂改善高尿酸血症提供一定的理论依据。
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