肟化衍生反应优化及其在聚糖分析中的应用

作者：朱文杰; 雷家珩; 王华伟^*; 林亚维^*

来源：分析科学学报, 2019, 35(04): 423-427.

DOI：10.13526/j.issn.1006-6144.2019.04.005

• 聚糖
• 荧光衍生
• 4-氨氧基甲基-7-羟基-香豆素
• 高效液相色谱
• 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱

本文采用新型氨氧基荧光衍生化试剂4-氨氧基甲基-7-羟基-香豆素(AOHC)成功对聚糖进行荧光标记。实验使用麦芽七糖(DP7)为模型聚糖,利用响应面法与单因素法对AOHC与DP7的衍生反应参数,如标记试剂用量、反应pH、反应温度、反应时间以及催化剂进行了优化。结果表明,与传统标记试剂2-氨基苯甲酰胺(2-AB)相比,AOHC衍生化法具有反应时间短、灵敏度高且不需复杂富集和纯化步骤等优点。采用AOHC衍生化法对糖蛋白RNase B中聚糖进行基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析,成功检测出所有5种聚糖。AOHC衍生化方法操作简便、快速、灵敏,在聚糖分析中具有很好的应用前景。

• 单位
  生命科学学院; 武汉理工大学