摘要

目的观察微小RNA-3915(miR-3915)在肾癌中的表达及其生物学意义。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测14例肾癌及癌旁组织中miR-3915的表达量,同时检测正常肾小管上皮细胞株和肾癌细胞株中miR-3915的表达,以表达量最高的细胞株为实验对象。生物信息学预测软件预测并采用双荧光素酶报告基因验证miR-3915的靶基因。分别转染miR-3915抑制序列或阴性对照序列至肾癌细胞株,qRT-PCR检测miR-3915和靶基因mRNA的表达,Western blot检测细胞相应蛋白的表达。通过Transwell迁移、侵袭实验分别检测细胞的迁移和侵袭能力。结果相对于癌旁组织和正常肾小管上皮细胞,miR-3915在肾癌组织及肾癌细胞株中的表达明显上调(P<0.05),A498细胞表达量最高(P<0.01)。生物信息学预测并经双荧光素酶报告基因验证CMTM3是miR-3915的靶基因。miR-3915抑制序列可显著降低A498细胞miR-3915的表达(P<0.01),增加CMTM3mRNA的表达(P<0.01),使CMTM3、E-cadherin和β-catenin蛋白表达上调,Vimentin和Slug蛋白表达下调。A498细胞迁移和侵袭能力均降低(P<0.01)。结论 miR-3915在肾癌中的表达明显升高,通过抑制A498细胞中miR-3915的表达,可明显升高CMTM3基因的表达,抑制肾癌细胞的迁移和侵袭作用。

  • 单位
    荆门市第二人民医院