慢病毒载体介导SV40LT致人脐静脉内皮细胞永生化

作者:梁淑丽; 薛增福; 吕艳香; 刘洋; 梁树辉; 殷继鹏; 窦维佳; 赵晓迪; 赵宏喜; 聂勇战; 吴开春
来源:科学技术与工程, 2011, 11(11): 2423-2427.

摘要

为成功分离与鉴定人原代脐静脉内皮细胞,用猿猴病毒40大T抗原(SV40LT)异位表达建立永生化人脐静脉内皮细胞系。将含SV40LT cDNA片段的慢病毒载体,转染人原代脐静脉内皮细胞,连续传代培养。通过形态、细胞免疫组织化学、RT-PCR及管状成形试验进行原代及转染后细胞形态学和功能学鉴定及检测SV40大T抗原表达。结果SV40LT转染后的人脐静脉内皮细胞为扁平多角形或短梭状,呈单层铺路石状镶嵌排列。特异性表达Ⅷ因子、KDR、SV40LT表达,并具有管状成型能力。说明成功分离与鉴定永生化的脐静脉内皮细胞系,为后续血管靶向治疗奠定了基础。