血小板体外活化后高表达P选择素(CD62P)抑制细菌增殖并诱导其凋亡样改变

作者:王文婷; 陈要臻; 刘二雄; 徐金梅; 顾顺利; 陈禹彤; 胡兴斌; 张梦秋; 尹文*; 李靖*
来源:细胞与分子免疫学杂志, 2022, 38(09): 781-788.
DOI:10.13423/j.cnki.cjcmi.009469

摘要

目的 对比两种不同细菌活化血小板 P 选择素( CD62P) 分子表达水平及血小板对金黄色葡萄球菌( SA) 、大肠杆菌( E. coli) 增殖的抑制作用,并探索血小板抑制细菌增殖的分子机制。方法 选取浓度为 106菌落形成单位( CFU) /m L 的 SA、E. coli 分别与 2 × 1011/ L 洗涤纯化的血小板共培养后,使用全自动酶标仪检测菌液吸光度( A600) 值; 倍比稀释后,涂板计数各组细菌数量; 流式细胞术检测两种细菌与血小板共培养 2、4 h 后,血小板 CD62P 水平; ELISA 检测血小板活化后释放胞内蛋白血小板因子 4( PF4) 含量; 流式细胞术检测两种细菌与血小板共培养 12 h 后其分裂增殖的变化、流式细胞术检测两种细菌磷脂酰丝氨酸( PS) 外翻和细菌细胞膜电位改变情况。结果 血小板与 SA 共培养 6 h 后,菌液浊度明显降低; 与 E. coli 共培养 6 h 后,菌液浊度略有降低; 与对照组相比,两种细菌与血小板共培养后,细菌涂板计数均降低; SA、E. coli 与血小板共培养 2、4 h 后,CD62P 水平均升高,且血小板与 SA 共培养组的 CD62P 水平明显高于与 E. coli 共培养组; 血小板活化后其胞内蛋白 PF4 释放量明显增加; 血小板处理细菌后其分裂增殖速度均降低,且两种细菌均出现细胞膜 PS 外翻、细胞膜电位去极化。结论 血小板体外活化后高表达 CD62P,抑制 SA、E. coli 的增殖并诱导其发生细胞凋亡样改变,且血小板对 SA 的抑制作用优于对E. coli 的抑制作用。

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