猪繁殖与呼吸综合征病毒的纯化与形态观察

作者：魏德陇; 张婧; 李坤; 孙普; 白兴文; 包慧芳; 李冬; 刘在新; 卢曾军^*; 曹轶梅^*

来源：中国兽医科学, 2021, 51(12): 1519-1524.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0198

• 猪繁殖与呼吸综合征病毒
• 纯化
• 形态学
• 蔗糖密度梯度

为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)全病毒抗原,用于免疫学研究,本研究在Marc-145细胞上繁殖了PRRSV基因Ⅱ型VR2332株,经聚乙二醇浓缩后,用蔗糖密度梯度离心法纯化PRRSV病毒粒子。用电子显微镜观察病毒粒子形态结构,并用SDS-PAGE、免疫印迹等方法分析了纯化效果。结果显示,电子显微镜观察到PRRSV形状呈球形或椭圆形,囊膜表面有微绒毛样突起,病毒粒子大小不一,大多数直径在50～80 nm之间,有极少数直径超过120 nm。SDS-PAGE可见病毒的多个结构蛋白条带,利用感染康复猪血清进行免疫印迹检测显示,M蛋白的印迹条带最深,显示纯化病毒具有良好的反应活性,为后续免疫学研究奠定了基础。

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 农业部; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室