环介导等温扩增技术用于检测幽门螺旋杆菌CagA基因

作者：张超群; 吴丹丹; 马士朝; 孙殿兴^*

来源：中国微生态学杂志, 2019, 31(05): 523-527.

DOI：10.13381/j.cnki.cjm.201905006

• 幽门螺旋杆菌
• 环介导等温扩增技术
• CagA

目的建立环介导等温扩增技术(LAMP)用于检测唾液和胃液中幽门螺旋杆菌CagA基因。方法收集临床阳性样本并用荧光定量PCR检测,然后根据幽门螺旋杆菌的CagA基因序列设计LAMP引物并优化反应条件。通过LAMP检测来验证引物的特异性,并通过检测稀释的模板来验证引物的灵敏性。同时加入钙黄绿素使产物显色,使CagA基因检测可视化。最后,用LAMP方法检测收集的临床样本,并计算阳性率,应用配对卡方检验比较LAMP和荧光定量PCR的统计学差异。结果 LAMP体系的特异性和灵敏性均较好,对CagA基因检测的灵敏性是102 IU/mL。另外,利用钙黄绿素进行产物检测的效果和电泳结果相当。通过对临床样本的检测,CagA阳性样本的LAMP检测结果和荧光定量PCR差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LAMP对CagA基因的检测具有较好的特异性和灵敏性,操作简便,在基层医院有较好的应用前景。