人肺腺癌多药耐药细胞系A549/cDDP的建立及相关基因表达检测

作者：潘永成; 赵伟刚; 王建军; 刘全; 杨光海; 李劲松

来源：中国肺癌杂志, 2009, 12(03): 187-191.

DOI：10.3779/j.issn.1009-3419.2009.03.002

• 肺肿瘤
• 多药耐药
• 基因表达

背景与目的现有研究表明,肺癌细胞多药耐药造成的化疗失败是影响患者生存率的主要原因。本研究旨在建立人肺癌多药耐药细胞系,研究其耐药特性和机制。方法应用人肺腺癌细胞株A549,采用顺铂(cDDP)大剂量间歇诱导法,建立多药耐药细胞系A549/cDDP。相差显微镜观察细胞形态和结构差异,绘制两种细胞的体外生长曲线。用MTT法检测该耐药细胞株对多种化疗药物的多药耐药性,采用流式细胞术检测该耐药细胞表面多耐药基因(MDR)的表达产物P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)及谷胱甘肽硫转移系统(GSH/GST)的表达情况,应用RT-PCR检测MDR、MRP基因表达水平。结果A549/cDDP对多种抗癌药物耐药,各种抗癌药物IC_(50)显著提高:(70.5±4.9)%的A549/DDP细胞表面P-gp表达阳性,而对照细胞A549表达仅为(42.4±5.6)%;(29.4±2.9)%的A549/DDP细胞表面MRP表达阳性,而对照细胞A549表达仅为(21.4±3.5)%,二者有差异(t=11.94; t=5.56,P均<0.01);A549/cDDP和A549细胞的GSH/GST表达无明显变化(P>0.05)。RT-PCR检测发现A549/cDDP中的MDR mRNA及MRP mRNA高表达。结论建立的A549/cDDP具有明确的多药耐药性,其多药耐药基因MDR mRNA及MRPmRN4表达升高。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院