ASPP2基因及其甲基化在胃癌细胞中的表达及调节

作者：汤建燕; 赵登秋^*; 邬叶锋; 周龙翔

来源：中华内分泌外科杂志, 2019, (03).

• ASPP2
• DNA甲基化
• 胃癌
• 5-Aza-CdR

目的 观察胃癌细胞中ASPP2基因与ASPP2基因启动子区域甲基化的表达及调节,探讨其与胃癌的关系。方法 Real-time PCR及亚硫酸氢盐测序法检测MKN-45和MGC-803两种胃癌细胞株及正常胃黏膜上皮细胞(GES-1细胞)中ASPP2基因的mRNA表达及启动子区域的甲基化状况；CCK-8法检测经过不同浓度的5-Aza-CdR(分别为：0.5、2.0、8.0、32.0及128.0 μmol/L)处理胃癌细胞后的生长抑制率,去甲基化处理后再次检测两种胃癌细胞中ASPP2基因的mRNA表达和甲基化状况。结果 ① MKN-45细胞、MGC-803细胞和GES-1细胞ASPP2 mRNA的相对表达量分别为1.130±0.053、0.993±0.051及2.121±0.047,MKN-45细胞及MGC-803细胞较GES-1细胞均显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)；两种胃癌细胞株ASPP2 mRNA的相对表达量相比,差异无统计学意义(P>0.05)。② MKN-45细胞、MGC-803细胞和GES-1细胞ASPP2的甲基化率分别为(11.73±0.69)%、(2.39±0.25)%、(1.92±0.15)%,MKN-45细胞较GES-1细胞显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)；MGC-803细胞较GES-1细胞差异无统计学意义(P>0.05)；MKN-45细胞较MGC-803细胞显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。③在同一作用时间下,MKN-45细胞及MGC-803细胞各5-Aza-CdR浓度组的生长抑制率随着5-Aza-CdR处理浓度的增加而增加,呈药物浓度依赖性。④经24 μmol/L 5-Aza-CdR处理48 h后,MKN-45细胞、MGC-803细胞ASPP2 mRNA的相对表达量分别为1.842±0.026和1.106±0.043,MKN-45细胞较处理前显著升高,差异有统计学意义(P<0.01),MGC-803细胞较处理前差异无统计学意义(P>0.05)；MKN-45细胞、MGC-803细胞ASPP2的甲基化率分别为(3.60±0.31)%、(2.23±0.11)%,MKN-45细胞较处理前显著降低,差异有统计学意义(P<0.01),MGC-803细胞较处理前差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ① MKN-45细胞的ASPP2基因启动子区域的异常高甲基化可能是ASPP2基因mRNA表达降低的分子机制。②甲基化抑制剂5-Aza-CdR可抑制胃癌细胞MKN-45、MGC-803的生长；并促进MKN-45细胞ASPP2基因mRNA的表达,ASPP2基因启动子区域的甲基化逆转是其可能的机制。③ ASPP2基因启动子区域的异常高甲基化导致的mRNA表达降低可能与胃癌的发生相关。

• 单位
  上海市奉贤区中心医院; 周浦医院; 上海健康医学院; 上海市第六人民医院金山分院