摘要
目的探讨microRNA-335-5p(miR-335-5p)对类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞(RASFs)增殖、侵袭和凋亡的影响。方法选取2018年3月—2019年3月湖州市第三人民医院收治的50例类风湿性关节炎(RA)患者和50例接受关节置换手术的关节外伤患者的滑膜组织标本,并分离培养RASFs。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测滑膜组织和RASFs中miR-335-5p和DKK1的表达,荧光素酶报告基因检测评估miR-335-5p对DKK1荧光素酶活性的影响。将miR-335-5p模拟物、si-DKK1和pcDNA-DKK1转染RASFs,分别通过ELISA比色法、Transwell法和流式细胞术检测细胞增殖、侵袭和凋亡情况。结果与正常组织和RASFs相比,miR-335-5p在RA组织和RASFs中下调(P <0.05),而DKK1在RA组织和RASFs中上调(P <0.05)。荧光素酶报告基因检测显示,miR-335-5p可特异性结合DKK1的3′UTR,抑制其荧光素酶活性(P <0.05)。此外,miR-335-5p可降低DKK1的表达(P <0.05)。过表达miR-335-5p或敲除DKK1可抑制RASFs的增殖和侵袭,诱导RASFs凋亡(P <0.05)。而过表达DKK1可逆转miR-335-5p对RASFs的影响(P <0.05)。结论miR-335-5p可通过直接靶向DKK1的表达,抑制RASFs的增殖和侵袭,诱导其凋亡。
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单位湖州市第三人民医院