M2型巨噬细胞通过CCL22-CCR4信号促进肺泡上皮细胞EMT

作者：王璐; 徐婷贞; 周林水; 朱渊红^*

来源：中国病理生理杂志, 2022, 38(10): 1848-1855.

• 肺纤维化
• 上皮间充质转化
• 巨噬细胞极化
• M2型巨噬细胞
• CCL22-CCR4信号通路

目的：探讨M2型巨噬细胞通过CCL22-CCR4轴对肺泡上皮细胞上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响，并探讨其机制。方法：取THP-1单核细胞，经特定细胞因子分化成为M0、M1和M2型巨噬细胞，通过Transwell小室对不同表型巨噬细胞和肺泡上皮细胞(A549细胞)进行共培养(0、24、36、48或72 h)，分别采用CCK-8法、划痕实验、Annexin V-FITC/PI双染法检测各组上皮细胞活力、迁移、凋亡水平；ELISA检测各组细胞上清C-C基序趋化因子22(C-C motif chemokine 22,CCL22)的表达；RT-qPCR和/或Western blot检测各组细胞上皮、间充质标志物和趋化因子受体4(C-C motif chemokine receptor 4,CCR4)水平，以及Smad2/3信号激活水平；采用CCR4抑制剂，进一步验证CCL22-CCR4-Smad2/3信号通路在M2型巨噬细胞介导的肺泡上皮细胞EMT中的作用。结果：与正常对照组A549细胞相比，M1型巨噬细胞可显著抑制A549细胞活力、迁移能力并诱导其凋亡(P<0.01);M2型巨噬细胞则可促进A549细胞迁移并抑制其细胞凋亡(P<0.05)。与此同时，M2型巨噬细胞共培养可导致A549向间充质细胞形态改变，上皮标志物E-cadherin表达减少，间充质标志物fibronectin、α-SMA表达增多(P<0.05)。ELISA结果显示，与M2型巨噬细胞共培养后，细胞上清中CCL22表达增多；Western blot结果显示M2型巨噬细胞可促进A549细胞CCR4表达上调及Smad2/3信号通路的激活(P<0.05)；当CCR4被抑制后，M2型巨噬细胞诱导上皮细胞EMT的作用显著减弱，并且Smad2/3磷酸化蛋白表达也显著下调(P<0.01)。结论：M2型巨噬细胞促进上皮细胞EMT，其机制可能与激活CCL22-CCR4-Smad2/3信号通路有关。

• 单位
  浙江中医药大学; 浙江省中医院