华蟾素体外抑制胆囊癌GBC-SD细胞增殖与侵袭的机制研究

作者：李俊杰; 邬海峰; 张东明; 张志平; 李明章^*

来源：中国当代医药, 2021, 28(31): 27-241.

• 华蟾素
• 胆囊癌
• 增殖
• 侵袭
• 凋亡

目的探讨华蟾素体外抑制胆囊癌GBC-SD细胞增殖、侵袭并诱导凋亡的机制。方法应用CCK-8细胞计数法和平板克隆形成实验,检验不同浓度华蟾素(0、100、300、500 nmol/L)作用后GBC-SD细胞增殖能力的改变;采用AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测不同浓度华蟾素(0、100、300、500 nmol/L)对GBC-SD细胞凋亡的影响;采用流式细胞仪检测华蟾素对GBC-SD细胞周期的影响;通过Transwell小室实验观察华蟾素作用后的胆囊癌细胞侵袭能力的改变。其中,将华蟾素浓度为0 nmol/L作为空白无用药组。结果与空白无用药组比较,华蟾素以时间和剂量依赖性抑制GBC-SD细胞的增殖(P<0.01);AnnexinⅤ-FITC/PI双染法结果表明,华蟾素具有诱导GBC-SD细胞凋亡的能力(P<0.01)。随着华蟾素用药浓度的增加,GBC-SD细胞生存率显著下降,细胞凋亡率(早期凋亡率与晚期凋亡率)显著上升(P<0.01)。华蟾素可促进促凋亡蛋白Cleaved-PARP、Cleaved-caspase3、Cleaved-caspase9、BAX的表达量,并降低抑凋亡蛋白Bcl-2的表达量。分布于G2/M期的细胞比例随着华蟾素用药浓度的增加而增加,差异有统计学意义(P<0.05)。随着华蟾素用药浓度的增加,G2/M期进展调节相关蛋白CDK1和Cyclin B1的表达量均下降(P<0.01)。侵袭细胞数量随着华蟾素用药浓度的升高而降低(P<0.001)。侵袭性抑制相关蛋白E-cadherin的表达量均高于空白无用药组,促侵袭性相关蛋白N-cadherin、Vimentin的表达量低于空白无用药组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论华蟾素可有效地抑制胆囊癌GBC-SD细胞的增殖及侵袭的能力,并可诱导其凋亡。

• 单位
  包头医学院