结核分枝杆菌pdhA基因的原核表达及其免疫原性分析

作者：王华南; 亓英芳; 朱婷; 于申业; 刘慧芳; 司微; 杨盛; 王加明; 冯拥军; 李素兰; 于秀婷; 王春来; 刘思国

来源：中国兽医科学, 2011, (07): 697-700.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2011.07.005

• 结核分枝杆菌
• pdhA基因
• 原核表达 Mycobacterium tuberculosis
• pdhA gene
• prokaryotic expression

以结核分枝杆菌H37Rv菌株的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出1 100bp的pdhA(pyruvate dehydrogenase E1component alpha subunit)基因,经限制性酶切后,与pET-28a载体连接,转化到大肠杆菌BL21中,重组菌经1mmol/L IPTG诱导表达了pdhA蛋白,并用Ni-His-resin纯化了目的蛋白,经Western-blot分析鉴定了目的蛋白的免疫原性。结果显示,重组质粒的双酶切鉴定和DNA测序均正确;SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,在44ku处获得一目的条带,且具有很好的免疫原性。本研究成功获得了高纯...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 新疆生产建设兵团; 兽医生物技术国家重点实验室