枯草芽孢杆菌224 yplQ基因敲除及其对溶血性的影响

作者:喻江; 范国权; 李璐; 王旭达; 李琬; 李景鹏
来源:东北农业大学学报, 2010, (07): 74-78.
DOI:10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2010.07.015

摘要

为了确定枯草芽孢杆菌224(Bacillus subtilis 224,BS224)的溶血基因或引起溶血的主效基因,以枯草芽孢杆菌224基因组DNA为模板,用PCR方法分别扩增yplQ基因上游约1.0 kb和yplQ基因下游0.5 kb两段DNA序列,并以携带新霉素抗性基因的重组质粒pMD18-T-neo为骨架,构建基于yplQ基因位点的基因阻断质粒pMD18-T-neo-yplQ,线性化后电转化至枯草芽孢杆菌224,通过新霉素抗性平板得到36个neor抗性转化子,基因组PCR鉴定和核苷酸测序证明,确定yplQ18为yplQ基因缺失菌株,将其接种到5%的绵羊血琼脂平板上进行溶血性检测,仍能引起...

  • 单位
    黑龙江省农业科学院; 辽宁省农业科学院大连生物技术研究所; 东北农业大学

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