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摘要
为了建立一种能快速检测鹅星状病毒(GoAstV)、鹅圆环病毒(GoCV)、鹅细小病毒(GPV)、鸭坦布苏病毒(DTMUV)的多重PCR检测方法，本研究根据GenBank数据库已公布的GoAstV的ORF2基因、GoCV的Rep基因、GPV的VP3基因及DTMUV的NS5基因序列，分别设计4对特异性扩增引物，通过对扩增条件的优化及特异性、灵敏性的检验，建立了可同时检测以上4种病原的多重PCR检测方法，并对40份临床样品进行检测。结果显示，建立的多重PCR检测方法具有良好的特异性和较高的灵敏性，可同时扩增出大小为731 bp(GoAstV)、543 bp(GoCV)、392 bp(GPV)、200 bp(DTMUV)的特异性片段，且利用本试验建立的多重PCR检测方法对水禽其他病原体进行扩增均呈阴性。该方法对GoAstV、GoCV、GPV及DTMUV最低检出限度分别为4×103,4.22×103,4.43×103,4.73×103 copies/μL。单一PCR检测方法对临床病料样品检测结果与多重PCR检测结果一致，证明该方法可用于这4种病原临床病料样品的检测。
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