褪黑素调控Nrf2/ARE信号通路延缓髓核间充质干细胞退变的实验研究

作者：李才; 许盼盼; 胡捷; 朱坤; 叶雨辰; 张亚伟; 张长春^*

来源：中华全科医学, 2022, 20(11): 1831-1851.

DOI：10.16766/j.cnki.issn.1674-4152.002713

• 椎间盘退变
• 褪黑素
• 氧化应激
• 髓核间充质干细胞
• 活性氧

目的 探讨褪黑素对氧化应激条件下的大鼠髓核间充质干细胞(NPMSCs)的影响及调节机制。方法 使用差速贴壁法获取大鼠NPMSCs。显微镜下观察细胞状态，鉴定第三代细胞三系分化潜能和细胞表面免疫标志物；采用CCK-8法检测不同浓度过氧化氢和褪黑素诱导对大鼠NPMSCs活力的影响确定最佳浓度和实验分组；免疫荧光和流式细胞学技术检测NPMSCs活性氧水平；免疫印迹分析外基质标志蛋白(Ⅱ型胶原、糖胺聚糖)和通路核心蛋白(Nrf2、HO-1)表达情况。结果 褪黑素在氧化应激下保护了NPMSCs的活性，且1μmol/L浓度保护效应最为明显(0.717±0.018,t=7.102,P<0.01)。褪黑素可抑制NPMSCs在H2O2诱导后的活性氧水平(阳性率70.0%vs. 32.7%)。此外，褪黑素还能显著提高Nrf2/ARE信号通路中关键蛋白核因子E2相关因子(1.925±0.024,t=13.150,P<0.01)和血红素氧合酶-1(1.605±0.019,t=12.940,P<0.01)的活性，改善NPMSCs的功能。褪黑素治疗后，细胞基质蛋白Ⅱ型胶原(0.850±0.010,t=25.200,P<0.01)和糖胺聚糖(0.335±0.013,t=10.640,P<0.01)表达增加。结论 褪黑素通过调控Nrf2/ARE信号通路可以影响NPMSCs退变的生物学特性。

• 单位
  蚌埠医学院第一附属医院; 安徽省组织移植重点实验室; 蚌埠医学院