福氏志贺菌2a多药耐药基因marA的克隆及其原核表达

作者：王松泰; 张继瑜; 魏小娟; 曹小安; 邱昌庆

来源：中国兽医科学, 2008, (06): 500-503.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2008.06.009

• 福氏志贺菌2a
• marA基因
• 克隆
• 原核表达 Shigella flexneri 2a
• marA gene
• cloning
• prokaryotic expression

根据福氏志贺菌2a多药耐药基因marA的序列,设计并合成了1对特异性引物,在引物的5′和3′端分别加入含有BamHⅠ和SalⅠ限制性酶切位点的序列,以福氏志贺菌2a菌株基因组DNA为模板扩增了marA基因序列。将PCR产物与pMD18-T载体连接,转化到大肠杆菌DH5α。鉴定成功获得目的片段后,经BamHⅠ+SalⅠ双酶切并与载体pET-30a连接,构建原核表达质粒pET-30a-marA,并将其转化宿主菌BL21(DE3)pLys,用IPTG诱导其表达。SDS-PAGE分析表明,重组载体pET-30a-marA可成功地在大肠杆菌中表达MarA蛋白。Western-blotting检测证明,该...

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所; 甘肃农业大学; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室