成年小鼠心成纤维细胞的原代培养及生物学特性

作者：辛毅; 刘飒; 许秀芳; 李温斌; 黄益民; 罗毅; 周玉杰

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2012, (11): 1194-1199.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006654

• 成年小鼠
• 心成纤维细胞
• 分离和原代培养
• 生物学鉴定 adult mice
• cardiac fibroblasts
• isolation
• primary culture
• bio-assay

目的:建立适用于成年小鼠心成纤维细胞的体外分离培养及鉴定的技术方法。方法:应用胰蛋白酶、Ⅱ型胶原酶联合消化法及组织贴块法两种方法对小鼠心成纤维细胞进行体外培养。在倒置显微镜下观察心成纤维细胞生长情况;台盼蓝法测定细胞传代成活率;通过绘制生长曲线法、MTT法、DNA周期检测比较两种方法获得的心成纤维细胞的增殖情况;观察不同培养基对心成纤维细胞生长的影响;苏木素-伊红(HE)染色观察细胞形态,采用免疫荧光染色观察培养细胞波形蛋白、纤维连结蛋白及盘状结构域受体2(DDR2)的表达。结果:酶联合消化法分离培养的细胞1 d后,在倒置相差显微镜下可见细胞贴壁呈长椭圆形生长,3 d后生长迅速呈长梭形;贴块法...

• 单位
  北京市心肺血管疾病研究所; 首都医科大学附属北京安贞医院