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摘要
目的通过维生素D3结合尼古丁法构建血管钙化动物模型,观察血管钙化过程中的微小RNA(miRNA,miR)谱变化,并通过生物信息学预测分析miRNA靶基因,采用Affemitrix miRNA芯片检测血管钙化模型组和对照组主动脉组织中miRNA表达谱变化(设2倍改变为阈值),筛选差异表达的miRNAs。方法7周龄雄性SD大鼠30只,随机分为两组,每组15只,采用维生素D3(300 kIU/kg)肌肉注射和尼古丁(5 mg/kg)灌胃建立大鼠血管钙化动物模型。对照组给予等体积的生理盐水处理。诱导4周后处死大鼠并分离主动脉组织。提取组织RNA,纯化获得miRNAs,采用Affemitrix miRNA芯片检测血管钙化模型组和对照组主动脉组织中miRNA表达谱变化(设2倍改变为阈值),筛选差异表达的miRNAs。结果诱导第20天模型组大鼠血钙水平显著升高(P=0.000)。碱性磷酸酶(ALP)的检测结果显示,与对照组比较,模型组大鼠ALP活性明显升高,第20天时,模型组大鼠ALP活性增高了85.7%。miRNA芯片结果表明在模型组中,mmu-miR-297a的表达量明显下调。结论成功构建血管钙化动物模型,通过筛选差异表达的miRNAs,可见mmu-miR-297a在血管钙化模型中表达下调。
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