摘要
目的探讨HOXC-AS3通过微小RNA(miR)-1269对大肠癌细胞转移特性的影响及其机制。方法采用定量荧光聚合酶链式反应(QF-PCR)分析人大肠癌细胞株HT-29、LoVo和SW620中HOXC-AS3表达水平;采用脂质体将NC-短发卡RNA(shRNA)和HOXC-AS3 shRNA转染至SW620细胞后, 分为NC-shRNA组和HOXC-AS3 shRNA组, 采用划痕实验、Transwell实验和蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞迁移、侵袭和上皮-间充质转化能力;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析HOXC-AS3的靶基因;并采用QF-PCR分析细胞中HOXC-AS3的靶基因miR-1269的表达水平。组间计量数据比较采用t检验。结果大肠癌细胞株SW620细胞HOXC-AS3表达水平(1.67±0.11)明显高于大肠癌细胞株HT-29和LoVo细胞(1.20±0.13;1.08±0.12), 差异有统计学意义(t=6.703、8.478, P<0.05)。NC-shRNA组细胞HOXC-AS3表达水平(0.98±0.08)明显高于HOXC-AS3 shRNA组水平(0.28±0.06), 差异有统计学意义(t=17.560, P<0.05)。NC-shRNA组细胞划痕愈合率[(84.75±4.36)%]明显高于HOXC-AS3 shRNA组[(40.28±7.67)%], 差异有统计学意义(t=12.340, P<0.05)。NC-shRNA组细胞迁移数量[(129.50±13.07)个]明显高于HOXC-AS3 shRNA组[(70.83±9.32)个], 差异有统计学意义(t=8.956, P<0.05)。NC-shRNA组上皮细胞标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平(0.69±0.10)明显低于HOXC-AS3 shRNA组(1.27±0.07), 差异有统计学意义(t=11.580, P<0.05)。NC-shRNA组细胞波形蛋白(Vimentin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平(1.30±0.10、1.35±0.07)明显高于HOXC-AS3 shRNA组(0.72±0.09、0.99±0.13), 差异有统计学意义(t=10.440、5.822, P<0.05)。miR-1269是HOXC-AS3的靶基因。NC-shRNA组细胞miR-1269表达水平(1.07±0.14)明显低于HOXC-AS3 shRNA组(1.79±0.13), 差异有统计学意义(t=9.267, P<0.05)。结论敲降HOXC-AS3可显著抑制大肠癌细胞迁移、侵袭和上皮-间充质转化能力, 其机制可能与靶向调控miR-1269的表达有关。
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单位新乡市中心医院; 新乡医学院