人正常胃黏膜细胞全长cDNA文库的构建及鉴定

作者：何震; 谢玉波; **

来源：成都医学院学报, 2010, (01): 8-11.

• 胃黏膜细胞
• cDNA文库
• 全长 gastric mucosa
• cDNA library
• full-length

目的构建人正常胃黏膜细胞的cDNA文库并鉴定文库质量。方法运用mRNA5′末端的模板转换方法以powerscript逆转录酶进行转录,在mRNA的5′末端添加一段5′oligo做为延伸后的模板,从而富集全长cDNA.扩增后的cDNAs经XhoI酶切、柱层析洗脱,重组于pGADT7载体并包装后,测定滴度、重组率,扩增文库。随机挑取16个克隆行PCR反应扩增插入片段。结果构建的cDNA文库滴度为4.00×106pfu/ml,重组率>95%,扩增后滴度达9.50×109pfu/ml,16个插入片段长度为0.5~2.0kb.结论构建的人正常胃黏膜细胞cDNA文库为高效全长的酵母双杂交cDNA文库,符合...

• 单位
  广西医科大学第一附属医院