摘要

目的评价蛋白激酶Cα/血红素氧合酶-1(PKCα/HO-1)信号通路在LPS致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤中的作用及其与线粒体融合的关系。方法肺泡Ⅱ型上皮细胞以2×105个/ml密度接种于96孔培养板,采用随机数字表法分为5组(n=40):对照组(C组)、Go6976组(G组)、内毒素组(L组)、内毒素+Go6976组(LG组)和内毒素+二甲基亚砜组(LD组)。LG组加入Go6976 5μmol/L,LD组加入等容量0.1%二甲基亚砜,30 min后L组、LG组和LD组分别加入LPS 10μg/ml制备肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤模型,G组加入Go6976 5μmol/L, C组加入等容量PBS。各组均孵育24 h后收集细胞,检测丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用q-PCR法及Western blot法测定细胞PKCα、HO-1以及线粒体融合蛋白1(Mfn1)、Mfn2和视神经萎缩蛋白1(OPA1)及其mRNA的表达水平。结果与C组比较,L组、LG组和LD组MDA和ROS含量升高,SOD活性降低,PKCα、HO-1及其mRNA的表达上调,Mfn1、Mfn2和OPA及其mRNA的表达下调(P<0.05),G组上述指标差异无统计学意义(P>0.05);与L组比较,LG组MDA和ROS含量升高,SOD活性降低,PKCα、HO-1、Mfn1、Mfn2和OPA1及其mRNA的表达下调(P<0.05),LD组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PKCα/HO-1信号通路激活是LPS致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的内源性保护机制,可能与促进线粒体融合有关。