摘要

目的探究萝藦果壳多糖(MJP-1’)诱导人肺癌A549细胞凋亡的作用。方法采用CCK8法检测萝藦果壳多糖对A549细胞活力的影响;采用比色法检测A549细胞内乳酸脱氢酶的释放量变化情况;通过TUNEL实验探究萝藦果壳多糖对A549细胞凋亡的影响;通过JC-1荧光探针探究萝藦果壳多糖对A549细胞线粒体膜电位的影响;通过蛋白质分子印迹法探究萝藦果壳多糖作用后A549细胞凋亡相关蛋白表达的变化。结果 CCK8法显示萝藦果壳多糖抑制A549细胞的增殖,并呈剂量依赖趋势(125μg/ml组:t=3.092,P=0.015;250μg/ml组:t=3.929,P=0.004;500μg/ml组:t=5.626,P<0.001;1 000μg/ml组:t=7.512,P<0.001;2 000μg/ml组:t=9.677,P<0.001;4 000μg/ml组:t=12.290,P<0.001;8 000μg/ml组:t=16.000,P<0.001);比色法显示A549细胞乳酸脱氢酶释放量增加(2 mg/ml组:t=8.233,P=0.001;4 mg/ml组:t=12.640,P<0.001;8 mg/ml组:t=27.530,P<0.001);TUNEL实验显示萝藦果壳多糖可促进A549细胞凋亡(2 mg/ml组:t=7.803,P<0.001;4 mg/ml组:t=12.460,P<0.001;8 mg/ml组:t=39.340,P<0.001);JC-1探针实验结果显示萝藦果壳多糖导致A549细胞线粒体膜电位降低(2 mg/ml组:t=24.120,P<0.001;4 mg/ml组:t=28.530,P<0.001;8 mg/ml组:t=31.600,P<0.001);蛋白质分子印迹法结果显示萝藦果壳多糖可以下调Bcl-2蛋白表达(2 mg/ml组:t=3.790,P=0.019;4 mg/ml组:t=6.598,P=0.003;8 mg/ml组:t=12.840,P<0.001),并使Bax、cleavedcaspase-3蛋白表达增加(Bax组:2 mg/ml组:t=17.280,P<0.001;4 mg/ml组:t=36.040,P<0.001;8 mg/ml组:t=22.520,P<0.001;cleaved-caspase-3组:2 mg/ml组:t=6.487,P=0.003;4 mg/ml组:t=9.326,P<0.001;8 mg/ml组:t=22.380,P<0.001)。结论本研究发现萝藦果壳多糖可以诱导人肺癌A549细胞凋亡,为进一步开发利用萝藦果壳多糖奠定了基础。