浓缩生长因子与1,25二羟基维生素D3对骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化的影响

作者：柳逸博; 王佐林

来源：口腔颌面外科杂志, 2016, 26(01): 13-18.

• 浓缩生长因子浓缩液
• 1,25(OH)2VD3
• 骨髓间充质干细胞
• 成骨分化

目的:研究浓缩生长因子(concentrated growth factor,CGF)及其与1,25二羟基维生素D3(1,25(OH)2VD3)联合应用时,对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖及成骨分化的影响。方法:全骨髓培养法提取、分离SD大鼠股骨BMSCs,分别采用6种不同培养液而分为6组。使用SD大鼠血液在Medifuge离心机中制备CGF,并收集CGF浓缩液。实验A、B、C组,分别为采用含5%、10%和20%浓度CGF的L-DMEM培养液组,单独使用1,25(OH)2VD3(10-10mol/L)的为D组。B组与D组混合为E组。F组为空白对照组。采用上述6组培养基孵育BMSCs 7 d。采用CCK-8实验评价大鼠BMSCs在不同条件下的生长增殖情况;ALP活性染色实验检测各组ALP的生成,实时定量PCR检测成骨分化标志物基因OCN、Col-1和Runx2共3种成骨分化标志物基因的表达情况。结果:5%和10%的CGF浓缩液能促进大鼠BMSCs增殖,且10%浓度优于5%浓度。而20%CGF和1,25(OH)2VD3(10-10mol/L)都抑制了大鼠BMSCs的增殖。1,25(OH)2VD3(10-10mol/L)与CGF(10%)浓缩液联合应用时,细胞增殖介于两者之间。A、B、C组ALP活性及OCN、Col-1和Runx2的mRNA表达均受到了抑制。D组和E组均促进了大鼠BMSCs的ALP活性,并提高了OCN、Col-1和Runx2的mRNA表达水平。结论:CGF浓缩液(10%)与1,25(OH)2VD3(10-10mol/L)的联合应用,可促进大鼠BMSCs的增殖,并对其成骨分化具有促进作用。

• 单位
  同济大学附属口腔医院