新型PCV2衣壳融合蛋白在HEK293F细胞瞬时表达研究

作者：罗清平; 彭妍; ALI Mohsin; 庄英萍; 郭美锦^*

来源：华东理工大学学报, 2023, 1-9.

DOI：10.14135/j.cnki.1006-3080.20221112002

• 猪圆环2型病毒
• 瞬时表达
• HEK293F
• 类病毒颗粒
• 疫苗

猪圆环2型病毒（Porcine circovirus type 2,PCV2）衣壳蛋白（Capsid）是制备抗猪圆环2型病毒亚单位疫苗的有效免疫抗原，能在大肠杆菌及杆状病毒/昆虫细胞表达系统中获得表达。然而在哺乳细胞中的表达研究仍然缺乏。瞬时表达条件考察结果显示，采用宿主HEK293F细胞及PE-40kDa转染试剂能获得35%病毒PCV2Capsid基因细胞转染效率。PEI/DNA比例差异会影响复合物形成大小及形态，复合物形成15-80 nm颗粒有利于转染效率的提高。实验以免疫逃逸型猪圆环病毒2b型NDSU41513病毒株，设计了新型PCV2衣壳融合蛋白Capsid(△1-41aa)-Fc(pig)(简称PCFP)。在3L反应器中成功实现了HEK293F细胞瞬时表达PCFP，表达水平达到3.8 mg/L。PCFP蛋白能够自主装形成约为41 nm类病毒颗粒，诱导小鼠机体内产生了强烈的体液免疫反应，具有很高的应用潜力。

• 单位
  生物反应器工程国家重点实验室; 华东理工大学